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病毒性心肌炎患者血浆外泌体生物标志物研究取得进展

日期:2020-03-03 22:53:44 来源: 中华医学杂志 点击:

病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是由多种病毒感染引起心肌炎症病变,该疾病临床确诊比较困难,到目前为止,心内膜活检仍然是VMC确诊的金标准,由于心肌活检难度大,并且存在创伤风险,导致其在临床上不能广泛开展。有研究报道,血液外泌体可能在柯萨奇B病毒引起的VMC发病的病理生理机制中扮演重要角色。通过比较心血管疾病患者血浆外泌体差异蛋白质组,有可能筛选出隐藏的生物学信息,这将为寻找敏感特异的生物标志物及新的药物靶点提供新的思路。

河南省人民医院心内科赵宗磊等分别收集河南省人民医院(2016年1月至2017年12月)Control组健康人及VMC组患者血浆标本各50份,按照随机数字表法选取Control组(n=5)与VMC组(n=5)空腹血浆标本各1 ml,分别利用超速离心法提取血浆外泌体后,采用差异凝胶双向电泳(DIGE)技术进行蛋白质分离,经差异分析软件处理后,采集VMC组和Control组之间差异>2倍的蛋白质点,通过应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间/飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)对差异蛋白点进行鉴定。各组随机采取40份血浆外泌体标本,采用VMC特异性差异蛋白进行酶联免疫吸附实验(ELISA)验证。分析健康对照组(Control组)与病毒性心肌炎组(VMC组)血浆外泌体中的差异蛋白质组,筛选可能与VMC早期诊断密切相关的蛋白标志物。

结果发现,VMC组与Control组血浆外泌体蛋白组相比较,共筛选出10个差异蛋白点,包括8个上调蛋白点,2个下调蛋白点。经质谱鉴定后,表达上调的蛋白包括角蛋白2(KRT2)、角蛋白5(KRT5)、角蛋白9(KRT9)、角蛋白77(KRT77)、角蛋白78(KRT78)、锌-α2糖蛋白(AZGP1)、触珠蛋白(HP)和视黄醇结合蛋白4(RBP4);表达下调的蛋白是CD5抗原样蛋白(CD5L)和补体C1q亚基B(C1QB)。选取RBP4进行ELISA验证,结果表明,与Control组[(64.5±2.6)μg/L]相比较,VMC组[(148.7±3.9)μg/L]血浆外泌体中RBP4特异性表达上调(P<0.05),与DIGE结果一致。



(责任编辑:xsq)

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