交叉配血-凝聚胺法 - 输血 - 国际王中王最新医学网 - 首页-王中王最新医学门户网站
您当前所在位置: 首页 > 王中王最新医学 > 输血 > 正文

交叉配血-凝聚胺法

日期:2020-01-01 12:51:26 来源:中华王中王最新医学网 点击:

1.原理

凝聚胺(polymatching)法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液,中和红细胞表面的负电荷。

缩短细胞间距,形成可逆的非特异性聚集,并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝聚胺引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。

2.标本采集

2.1标本种类:抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清,将细胞配成5%盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。

2.2标本要求:抗凝和干燥管均可,如用抗凝血主张用EDTAK2(mg/dz)抗凝标本应无溶血,切标签齐全。

3.标本储存:急诊标本30分钟内完成操作,标本应至4℃冰箱保存7天。

4.标本运输:室温运输。

5.标本拒收标准:细菌污染。溶血标本,标签不齐全不能作测定。

6.试剂

6.1试剂名称:凝聚胺试剂(polymatching)

6.2试剂生产厂家:(台资)珠海贝索生物技术有限公司。

6.3试剂组成:

试剂1.低离子介质(LowLonicMedium,LIM)。试剂打开使用后,可置室温贮存,未开封者2-10度贮存,有效期为2年。

试剂2.凝聚胺溶液(PolybreneSolution)。贮存及有效期同上。

试剂3.重悬液(ResuspendingSolution)。贮存及有效期同上。

试剂4.8.5%生理盐水。

7.仪器

7.1血型血清索离心机:XTL-4.7上海离心机械研究所

7.2离心机:上海手术器械厂

7.3电热恒温水箱:北京长源实验设备厂

7.4显微镜:OLYMPUS(日本)

8.操作步骤及结果判断:

8.1供受者红细胞用生理盐水配成3-5%的细胞悬液。加样量均为:血清2滴,红细胞悬液1滴。主管:受血者血清+供者红细胞悬液;次管:受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)医学`教育网搜集整理。

8.2各管分别加低离子介质0.6ml混匀置室温1分钟。加凝聚胺溶液2滴,混匀,置室温15秒。

8.31000g(3000rpm),离心18秒,弃上清液,管底保留约2滴液体。轻摇

试管,观察是否形成凝块。如未形成凝块,则重做前面试验。

8.4加入2滴重悬液,轻轻混合,肉眼或显微镜下观察结果。

8.5凝块在1分钟内分散,试验结果为阴性,供受者血液配合;反之,如依照为不同强度的凝块,试验结果判为阳性,供受者血液不配合。实验结果必须在3分钟内判读。

9.操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度较高,重复性好。

10.超出范围结果处理:

10.1细胞自凝:在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动,观察结果。

10.2若病人血清(血浆)含有肝素,如洗肾患者能影响配血,须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。

10.3红细胞悬液为5%为宜,过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当,反应不明显易误判。

10.4各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。

11.方法局限性:

11.1试管,滴管吸头和玻片必须清洁干燥,防止溶血。

11.2操作方法应按规定,先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。

11.3离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结果。

11.4观察时应注意红细胞呈特异性凝集,继发性凝固及线状排列的区别。



(责任编辑:陈雪礼)
上一篇: 配血方法的选择

相关阅读

站内搜索

品牌推荐

更多 >>

关闭二维码
关闭二维码
友情链接: 87ygh.space    5l1ke.online